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收缩宫斋生物测定法

时间:2019-08-24 06:11 作者:locoy 编辑:admin 浏览次数:

  本法系比较分松收缩宫斋规范品(S)与供试品(T)惹宗退体父亲鼠儿子宫收收缩的干用,以测定供试品的效价。

  规范品溶液的制备 取分松收缩宫斋规范品度过量,用新鲜配制的0.2%叁氯叔丁醇溶液(用1mol/LHCl调理到pH3.5)配制成1IU/ml的溶液,溶液分装于适宜的容器内,4~8℃贮放,阅历证僵持活性适宜要寻求的环境下,却在3个月内运用。

  规范品稀释液的制备 试验当天,取分松收缩宫斋规范品溶液,按高、低剂量组(dS2、dS1)加以0.9%氯募化钠溶液制成两种浓度的稀释液,普畅通高浓度稀释液却制成每1ml中含0.01~0.02单位,左右剂量的比值(r)普畅通不得父亲于1:0.7。调理剂量使低剂量能惹宗儿子宫收收缩,记载仪指针普畅通在20~50mm;高剂量应不致使儿子宫收收缩到臻极限,记载仪指针普畅通为50~85mm,且左右剂量所致儿子宫的收收缩应拥有清楚差异。

  供试品溶液与稀释液的制备 按供试品的标注示量或估计效价(AT),照规范品溶液与其稀释液的制备法制成供试品左右两种浓度的稀释液,其比值(r)应与规范品相当,供试品和规范品左右剂量所致的反应均值应相近。

  儿子宮肌蓄养液的制备 试验当天,取氯募化钠9g、氯募化钾0.42g、氯募化钙(按无水物计算)0.06g与葡萄糖0.5g,加以水700ml使溶松,另取碳酸氢钠0.5g,加以水条约200ml溶松后,缓缓倾注于前壹溶液中,遂加以遂搅拌,最末加以水度过量使成1000ml。

  供试用栽物 取强大健合格的成丁雌性父亲鼠,断乳后即与公鼠割裂,出产生后不超越3个月,体重160~240g。试验当天,选择阴道涂片在触动情初期的栽物,也却用雌性激斋处理使儿子宫涂片为触动情初期或触动情期的栽物。

  测定法 取选定的父亲鼠迅快处死,剖腔取出产儿子宫,细心佩退附在儿子宫肌上的结缔布匹局,剩意备止因牵弹奏使儿子宫肌受损。在儿子宫分叉处剪下摆弄2条,取壹条将其下永恒于退体器官日温水浴装置的浴杯底儿子部,上用线与记载装置相包,以描记儿子宫收收缩;浴杯中参加以壹定量的儿子宫肌蓄养液(条约30~50ml),就续畅通入度过量空气。蓄养液应调理到32~35℃并僵持日温(±0.5℃),儿子宫放入浴杯后,静置条约15分钟,按次第正确流入等体积的规范品或供试品两种浓度的稀释液(0.3~0.8ml),待儿子宫肌收收缩到最高点末了尾损变质时(条约60~90秒钟),放去蓄养液并用蓄养液涤除壹次,又参加以等量蓄养液,静置;相邻两次给药的距退时间应相当(条约3~5分钟),每回给药应在前壹次反应恢骈摆荡当行终止。规范品稀释液和供试品稀释液各取左右两个剂量(dS2、dS1、dT2、dT1)为壹组,按遂机区组设计的次第轮番动流入每组4个剂量,重骈4~6组。测各剂量所致儿子宫收收缩的高,照生物检定统计法(畅通则1431)中的量反应壹致线测定法计算效价及试验误差。

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